Um resultado anómalo da contagem de plaquetas deve dar origem a uma análise estruturada antes de ser comunicado. Um valor baixo ou elevado de PLT pode refletir uma alteração real na contagem de plaquetas do doente, mas também pode resultar da aglomeração de plaquetas, de fragmentos celulares, de uma recolha inadequada da amostra ou de interferências analíticas.

Por este motivo, a verificação dos resultados das plaquetas deve ir além da própria contagem de PLT. A análise dos parâmetros plaquetários associados, dos alertas do equipamento, dos padrões de distribuição, do estado da amostra, do estado do controlo de qualidade e dos resultados morfológicos ajuda os laboratórios a determinar se um resultado pode ser aprovado ou se requer uma investigação mais aprofundada.

1. O resultado do PLT é clinicamente consistente?

A primeira questão não é se o valor da PLT é elevado ou baixo. Trata-se de saber se o resultado é consistente com o perfil completo do hemograma completo e com a informação disponível sobre a amostra.

Um resultado inesperado do PLT pode justificar uma reavaliação quando:

• A contagem de plaquetas apresenta uma variação substancial em relação a um resultado anterior.
• O analisador gera um indicador relacionado com as plaquetas.
• O PLT não está alinhado com o MPV, o PDW, o PCT, o P-LCR nem o P-LCC.
• Outros resultados do hemograma completo, incluindo os índices de glóbulos vermelhos ou os resultados relativos aos glóbulos brancos, também são invulgares.
• A amostra apresenta-se coagulada, mal misturada, hemolisada, lipémica ou diluída.
• A contagem de plaquetas indicada não é compatível com o contexto clínico conhecido do doente.

Esta análise inicial ajuda a distinguir um problema isolado relacionado com as plaquetas de um problema mais abrangente relacionado com a amostra ou com a análise. Para os laboratórios que utilizam fluxos de trabalho de hematologia orientados para a morfologia, Ozelle desenvolve analisadores hematológicos e multifuncionais baseados em IA para contextos de diagnóstico humano e veterinário. O seu portfólio de produtos inclui sistemas baseados na combinação de IA × Morfologia Sanguínea Completa (CBM), nos quais a análise do hemograma completo pode ser analisada em conjunto com a classificação celular baseada em imagens e informações morfológicas.

2. Causas comuns de resultados falsamente baixos de PLT

Uma contagem baixa de plaquetas obtida por análise automatizada nem sempre indica uma verdadeira trombocitopenia. Vários fatores relacionados com a amostra e de natureza analítica podem reduzir o número de eventos plaquetários detetados pelo analisador.

Agregamento plaquetário relacionado com o EDTA

O EDTA é frequentemente utilizado nos exames de hemograma completo. Em algumas amostras, no entanto, ocorre agregação plaquetária após a colheita de sangue. Quando as plaquetas formam aglomerados, podem deixar de ser contadas como eventos plaquetários individuais. Os aglomerados maiores podem ficar fora do intervalo de medição das plaquetas ou ser classificados juntamente com populações celulares de maior dimensão.

Entre os indícios típicos de revisão contam-se:

• Uma contagem de plaquetas inesperadamente baixa.
• Um indicador de agregação plaquetária ou de aglomeração plaquetária.
• Um histograma de PLT anormal.
• Um resultado que não corresponde à contagem de plaquetas anterior do doente.
• Agregados plaquetários visíveis durante a análise do esfregaço de sangue periférico.

Este padrão é habitualmente descrito como pseudotrombocitopenia. O termo refere-se a um resultado baixo de plaquetas causado por um fenómeno in vitro da amostra, e não por uma redução confirmada das plaquetas circulantes.

Satelitose plaquetária

A satelitose plaquetária ocorre quando as plaquetas aderem aos glóbulos brancos, em particular aos neutrófilos, numa amostra submetida a anticoagulação. Uma vez que o analisador pode detetar um complexo de plaquetas e glóbulos brancos em vez de plaquetas individuais, a contagem automática de PLT pode ser subestimada.

Um esfregaço de sangue periférico é importante quando há suspeita de satelitose. Permite ao laboratório identificar a distribuição característica das plaquetas em torno dos glóbulos brancos e determinar se a contagem automatizada requer um método de verificação alternativo.

Microcoágulos e mistura inadequada

Pequenos coágulos e fios de fibrina podem reter plaquetas antes da análise. Podem formar-se após uma colheita de sangue difícil, um enchimento incompleto do tubo, uma agitação tardia ou insuficiente, ou a formação parcial de um coágulo antes de a anticoagulação fazer efeito.

Uma amostra com coágulos visíveis não deve ser tratada como uma amostra de repetição de exame de rotina. O tubo deve ser avaliado à luz dos critérios de aceitação de amostras do laboratório, devendo ser solicitada uma nova colheita caso a amostra não seja adequada.

Plaquetas gigantes

As plaquetas gigantes podem coincidir com a gama de tamanhos dos glóbulos vermelhos ou exceder a gama de deteção de plaquetas utilizada por alguns métodos de medição. Isto pode levar a um resultado subestimado da contagem de plaquetas (PLT) ou a um padrão de distribuição plaquetária atípico.

Os parâmetros MPV, PDW, P-LCR e o histograma plaquetário podem fornecer informações úteis de apoio. No entanto, devem ser interpretados em conjunto com os resultados do esfregaço de sangue, em vez de serem utilizados como confirmação isolada da presença de plaquetas de grande porte.

3. Causas comuns de resultados falsamente elevados de PLT

Pode ocorrer um resultado de plaquetas inesperadamente elevado quando partículas que não são plaquetas são contabilizadas dentro do intervalo de medição das plaquetas. Isto pode acontecer quando fragmentos celulares, glóbulos vermelhos muito pequenos ou outro material particulado se sobrepõem a eventos do tamanho das plaquetas.

Fragmentos de glóbulos vermelhos

Os esquistócitos e outros fragmentos de glóbulos vermelhos podem ser contabilizados como partículas do tamanho das plaquetas por alguns métodos analíticos. Consequentemente, a contagem automatizada de PLT pode ser superior à contagem real de plaquetas.

Este resultado requer mais do que uma simples verificação das plaquetas. Se se verificar fragmentação dos glóbulos vermelhos, o laboratório deve também analisar os parâmetros dos glóbulos vermelhos, os resultados morfológicos e os procedimentos locais relativos a anomalias clinicamente significativas no esfregaço.

Glóbulos vermelhos extremamente microcíticos

Na microcitose acentuada, os glóbulos vermelhos de tamanho reduzido podem sobrepor-se a partículas do tamanho das plaquetas. Esta sobreposição pode afetar a contagem automática de plaquetas e contribuir para um resultado de PLT falsamente elevado.

Os resultados relevantes da revisão podem incluir:

• Um MCV manifestamente baixo.
• Um padrão anómalo de distribuição dos glóbulos vermelhos.
• Um resultado do PLT que não corresponde ao esfregaço de sangue.
• Separação insuficiente entre a população de glóbulos vermelhos inferiores e os eventos plaquetários.

Quando se verifica uma microcitose significativa, um laboratório poderá necessitar de um método alternativo validado antes de comunicar o resultado final da contagem de plaquetas.

Detritos celulares e fragmentos anormais

Fragmentos de células leucémicas, detritos celulares, resíduos de glóbulos vermelhos hemolisados, microrganismos e outras partículas podem interferir na deteção das plaquetas. Dependendo do princípio de funcionamento do analisador, pode ser difícil distinguir estes elementos das plaquetas apenas com base no tamanho.

Por esse motivo, um resultado anormal da contagem de plaquetas (PLT) deve ser analisado em conjunto com os indicadores relativos aos glóbulos brancos (WBC), os padrões do diagrama de dispersão, os resultados relativos aos glóbulos vermelhos (RBC), o aspeto da amostra e a morfologia do esfregaço periférico. A contagem de plaquetas não deve ser interpretada de forma isolada quando vários parâmetros do hemograma completo (CBC) ou sinais do instrumento apresentam valores anormais.

Crioproteínas e interferência de partículas

Algumas amostras podem conter proteínas precipitadas ou material particulado que afeta a contagem automatizada. A precipitação de proteínas induzida pelo frio, a contaminação da amostra ou um fundo particulado invulgar podem dar origem a padrões numéricos ou gráficos inesperados.

Quando houver suspeita de interferência, os laboratórios devem seguir os seus procedimentos validados para o manuseamento das amostras e a confirmação dos resultados. Dependendo do fluxo de trabalho do laboratório, tal pode implicar a repetição da análise em condições controladas, uma nova recolha, a reavaliação do esfregaço ou um método de medição alternativo.

4. Um fluxo de trabalho prático para a verificação de PLT

Um processo de análise estruturado permite ao laboratório investigar resultados anormais de PLT sem recorrer a repetições desnecessárias dos exames.

1. Analise o resultado. Avaliar a PLT em conjunto com a MPV, a PDW, a PCT, a P-LCR, a P-LCC, os resultados anteriores e os parâmetros relacionados do hemograma completo.
2. Analise os sinais do analisador. Verifique os indicadores das plaquetas, o histograma das plaquetas (PLT), o histograma dos glóbulos vermelhos (RBC) e os diagramas de dispersão dos glóbulos brancos (WBC), quando disponíveis.
3. Inspecione a amostra. Verifique se há coágulos, fibrina, volume insuficiente, hemólise, lipemia ou eventual diluição.
4. Repita apenas quando for adequado. Misture e repita a análise da amostra apenas quando esta cumprir os critérios de aceitação do laboratório.
5. Realizar a análise do esfregaço quando indicado. Procure aglomerados de plaquetas, satelitose, plaquetas gigantes, esquistócitos, fragmentos ou células anormais.
6. Utilize um método de verificação alternativo sempre que necessário. Siga os procedimentos validados para um anticoagulante alternativo, método de medição, contagem manual ou estimativa por esfregaço.
7. Avaliar o sistema sempre que necessário. Caso se suspeite de um problema analítico, verifique o controlo de qualidade, o estado dos reagentes, a calibração, as contagens de fundo, o histórico de manutenção e as mensagens de erro.

O fluxo de trabalho deve separar as questões específicas de cada amostra das preocupações ao nível do sistema. Se uma amostra apresentar resultados anormais, mas os resultados do controlo de qualidade forem estáveis e as amostras de outros doentes forem consistentes, é mais provável que a origem esteja relacionada com a própria amostra. Se várias amostras apresentarem um desvio plaquetário semelhante, ou se os resultados do controlo de qualidade estiverem fora do intervalo aceitável, o laboratório deve avaliar o analisador, os reagentes, o estado de calibração e os registos de manutenção antes de comunicar os resultados afetados.

5. Quando é necessário realizar um esfregaço de sangue periférico

A análise do esfregaço de sangue periférico é uma parte fundamental da verificação dos resultados da contagem de plaquetas (PLT) quando a contagem automatizada é sinalizada como anómala, clinicamente inesperada ou inconsistente com outros resultados do hemograma completo (CBC). Proporciona evidências morfológicas diretas que podem não estar disponíveis apenas a partir dos dados numéricos.

Uma análise do esfregaço pode ajudar a identificar:

• Agregados de plaquetas, incluindo os que se concentram junto à borda franjada.
• Satelitose plaquetária em torno dos neutrófilos.
• Plaquetas gigantes ou macroplaquetas.
• Escistócitos e outros fragmentos de glóbulos vermelhos.
• Microcitose acentuada.
• Fragmentos de células leucémicas ou populações anormais de glóbulos brancos.
• Fios de fibrina e coagulação parcial.
• Outras partículas que podem afetar a contagem automática.

Nos casos em que a carga de trabalho exige mais do que uma simples análise numérica, os fluxos de trabalho de análise orientados para a morfologia podem acrescentar mais um nível de evidência. O Analisador hematológico automatizado O-Cyte 1 combina o hemograma completo (CBC) de 7 parâmetros com a análise morfológica assistida por IA num único fluxo de trabalho. Os seus resultados podem incluir imagens celulares, histogramas, informações morfológicas e classificação por IA baseada em imagens, permitindo que as equipas laboratoriais analisem os resultados quantitativos do hemograma completo no contexto da morfologia celular.

O O-Cyte 1 apresenta 37 parâmetros, incluindo PLT, MPV, PDW, PCT, PAg, P-LCC e P-LCR. Suporta sangue total, sangue capilar e o modo de pré-diluição; carregamento em lote de 25 amostras; modo STAT e modo de carregador automático; controlo de qualidade (CQ) de morfologia interna em líquido; e um rendimento de até 60 análises por hora em funcionamento autónomo. As configurações em cascata podem atingir até 360 análises por hora.

6. Anticoagulantes alternativos e métodos de confirmação

Quando se suspeita de aglutação plaquetária relacionada com o EDTA, pode considerar-se a recolha de uma nova amostra utilizando um anticoagulante alternativo, de acordo com o procedimento validado pelo laboratório. O citrato de sódio é frequentemente utilizado para este efeito, uma vez que pode reduzir a agregação plaquetária dependente do EDTA em algumas amostras.

No entanto, um resultado obtido com citrato não deve ser aceite sem revisão. O citrato provoca a diluição da amostra, pelo que qualquer fator de correção, configuração do analisador ou abordagem de comunicação dos resultados deve ser estabelecido através do próprio fluxo de trabalho validado do laboratório. A aglomeração plaquetária também pode persistir em amostras sem EDTA, pelo que a revisão morfológica pode continuar a ser necessária.

Dependendo da interferência suspeitada e dos métodos disponíveis no laboratório, a confirmação pode incluir:

• Recolha em citrato de sódio com um procedimento de correção validado.
• Contagem ótica de plaquetas.
• Contagem de plaquetas por fluorescência.
• Contagem manual de plaquetas.
• Estimativa do número de plaquetas no esfregaço periférico.
• Repita o ensaio num analisador alternativo ou utilizando um método analítico validado.

O método de confirmação deve corresponder à causa provável da interferência. Uma amostra que contenha aglomerados de plaquetas, por exemplo, requer uma abordagem diferente daquela utilizada para uma amostra que contenha esquistócitos, microcitose acentuada ou plaquetas de grande dimensão.

7. Controlo de qualidade e resolução de problemas do analisador

Nem todos os resultados anormais de PLT têm origem na amostra. Um desvio persistente no contagem de plaquetas, alertas repetidos relativos às plaquetas, variabilidade inexplicável ou resultados semelhantes em várias amostras podem indicar um problema no sistema analítico.

Quando se suspeitar de um problema ao nível do sistema, os laboratórios devem analisar:

• Dados diários sobre o estado do controlo de qualidade e as tendências do controlo de qualidade.
• Lote do reagente, condições de armazenamento, estado de carregamento e datas de validade.
• Registos de calibração ou de verificação da calibração.
• Resultados da contagem de fundo.
• Manutenção de rotina e registos de manutenção recentes.
• Alertas relacionados com a sonda, a fluídica, o arrastamento, o entupimento e as bolhas.
• Procedimentos de enxaguamento, preparação, limpeza e verificação do sistema especificados pelo fabricante.

O objetivo do controlo de qualidade (CQ) é confirmar que o sistema analítico está a funcionar dentro dos limites de desempenho definidos pelo laboratório. Se o CQ for inaceitável, os resultados dos doentes afetados não devem ser divulgados até que o problema tenha sido investigado e resolvido de acordo com a política do laboratório.

Isto torna-se particularmente relevante em laboratórios que precisam de combinar análises de hemograma completo de rotina com diferentes requisitos de fluxo de trabalho. Analisador hematológico Ozelle incluem sistemas baseados em IA × CBM para hospitais, laboratórios e contextos clínicos, com opções de modelos que abrangem análises compactas, painéis de análises multifuncionais e fluxos de trabalho de hematologia escaláveis.

Em toda a gama de produtos de hematologia, a informação publicada sobre os produtos inclui configurações de hemograma completo com 7 diferenciais, parâmetros relacionados com as plaquetas, análise da morfologia celular, processamento automatizado e diferentes opções de capacidade de processamento de amostras. As especificações de cada modelo, os tipos de amostras suportados, os formatos de controlo de qualidade e os menus de análises devem ser confirmados com base na documentação relevante do produto antes da implementação.

8. Prevenir erros evitáveis no PLT

Um fluxo de trabalho fiável na análise de plaquetas começa antes de a amostra entrar no analisador. A recolha padronizada, o manuseamento, as regras de análise dos resultados e a manutenção do equipamento reduzem a repetição desnecessária de análises e minimizam os atrasos na emissão dos resultados.

Os laboratórios devem definir procedimentos para:

• Tubos de colheita de sangue adequados e volumes de enchimento necessários.
• Mistura imediata e correta após a recolha.
• Limites relativos ao transporte, ao armazenamento e ao prazo para a análise.
• Critérios de rejeição de amostras devido à presença de coágulos visíveis ou a amostras inadequadas.
• Analise as regras relativas a alertas relacionados com as plaquetas, resultados inesperados de PLT, histogramas anormais e falhas na verificação delta.
• Critérios de análise e documentação do esfregaço de sangue periférico.
• Procedimentos alternativos de recolha de anticoagulantes.
• Comentários sobre o resultado final quando se identifica a aglomeração de plaquetas ou outra interferência.
• Revisão de controlo de qualidade, verificação da calibração e manutenção preventiva.

Um resultado anormal da contagem de plaquetas (PLT) requer um processo de análise que tenha em conta o estado da amostra, os sinais do analisador, os resultados morfológicos, o estado do controlo de qualidade e os métodos de confirmação validados. Esta abordagem garante a consistência na comunicação dos resultados das plaquetas, ao mesmo tempo que ajuda os laboratórios a identificar se uma contagem invulgar se deve à amostra do doente, a um padrão de interferência ou a um problema analítico.