Un résultat anormal concernant les plaquettes doit donner lieu à une analyse structurée avant d'être communiqué. Une valeur PLT faible ou élevée peut refléter une véritable variation du nombre de plaquettes chez le patient, mais elle peut également résulter d'un agrégation plaquettaire, de la présence de fragments cellulaires, d'un prélèvement inadéquat ou d'une interférence analytique.

C'est pourquoi la vérification des résultats plaquettaires ne doit pas se limiter à la numération des plaquettes (PLT) elle-même. L'examen des paramètres plaquettaires associés, des alertes générées par les appareils, des profils de distribution, de l'état des échantillons, du statut du contrôle qualité et des résultats morphologiques aide les laboratoires à déterminer si un résultat peut être validé ou s'il nécessite un examen plus approfondi.

1. Les résultats du test PLT sont-ils cohérents sur le plan clinique ?

La première question n'est pas de savoir si la valeur du PLT est élevée ou faible. Il s'agit plutôt de déterminer si le résultat est cohérent avec l'ensemble du bilan hématologique complet et les informations disponibles sur l'échantillon.

Un résultat inattendu du test PLT peut justifier un réexamen dans les cas suivants :

• Le nombre de plaquettes a considérablement changé par rapport au résultat précédent.
• L'analyseur génère un indicateur lié aux plaquettes.
• Le PLT n'est pas compatible avec le MPV, le PDW, le PCT, le P-LCR ni le P-LCC.
• D'autres résultats de la numération globulaire complète (CBC), notamment les indices des globules rouges (RBC) ou les résultats relatifs aux globules blancs (WBC), sont également inhabituels.
• L'échantillon semble coagulé, mal mélangé, hémolysé, lipémique ou dilué.
• La numération plaquettaire indiquée ne correspond pas au contexte clinique connu du patient.

Cet examen initial permet de distinguer un problème isolé lié aux plaquettes d'un problème plus général lié à l'échantillon ou à l'analyse. Pour les laboratoires utilisant des protocoles d'hématologie axés sur la morphologie, Ozelle développe des analyseurs hématologiques et multifonctionnels basés sur l'intelligence artificielle (IA) destinés au diagnostic humain et vétérinaire. Sa gamme de produits comprend des systèmes s'appuyant sur la technologie « IA × morphologie sanguine complète (CBM) », qui permet d'examiner l'hémogramme complet (CBC) en parallèle d'une classification cellulaire basée sur l'image et d'informations morphologiques.

2. Causes courantes de résultats de PLT faussement bas

Un faible nombre de plaquettes mesuré par un appareil d'analyse automatisé ne correspond pas toujours à une véritable thrombocytopénie. Plusieurs facteurs liés à l'échantillon et à l'analyse peuvent réduire le nombre d'événements plaquettaires détectés par l'analyseur.

Agrégation plaquettaire liée à l'EDTA

L'EDTA est couramment utilisé pour les analyses de la formule globulaire. Dans certains échantillons, cependant, une agrégation plaquettaire se produit après le prélèvement sanguin. Lorsque les plaquettes forment des agrégats, elles peuvent ne plus être comptabilisées comme des événements plaquettaires individuels. Les agrégats plus volumineux peuvent se situer en dehors de la plage de mesure des plaquettes ou être classés parmi des populations cellulaires plus importantes.

Parmi les indices typiques permettant de repérer une critique, on peut citer :

• Un nombre de plaquettes étonnamment bas.
• Un indicateur d'agrégation plaquettaire ou d'agrégation plaquettaire.
• Un histogramme des plaquettes (PLT) anormal.
• Un résultat qui ne correspond pas à la numération plaquettaire antérieure du patient.
• Aglutinats plaquettaires visibles lors de l'examen d'un frottis sanguin périphérique.

Ce phénomène est généralement qualifié de « pseudothrombocytopénie ». Ce terme désigne un faible taux de plaquettes dû à un phénomène lié à l'échantillon in vitro plutôt qu'à une diminution avérée du nombre de plaquettes circulantes.

Satellitose plaquettaire

La satellitose plaquettaire se produit lorsque les plaquettes adhèrent aux globules blancs, en particulier aux neutrophiles, dans un échantillon anticoagulé. L'analyseur pouvant détecter un complexe plaquette-globule blanc au lieu de plaquettes individuelles, le comptage automatisé des plaquettes (PLT) peut être sous-estimé.

Un frottis sanguin périphérique est important en cas de suspicion de satellitose. Il permet au laboratoire d'identifier la répartition caractéristique des plaquettes autour des globules blancs et de déterminer si le comptage automatisé nécessite une autre méthode de vérification.

Microcaillots et mélange insuffisant

De petits caillots et des filaments de fibrine peuvent piéger les plaquettes avant l'analyse. Ils peuvent se former à la suite d'un prélèvement sanguin difficile, d'un remplissage incomplet du tube, d'un mélange tardif ou insuffisant, ou d'une formation partielle de caillots avant que l'anticoagulation ne fasse effet.

Un échantillon présentant des traces visibles de coagulation ne doit pas être traité comme un échantillon de réexamen de routine. Le tube doit être évalué au regard des critères d’acceptation des échantillons du laboratoire, et un nouveau prélèvement doit être demandé si l’échantillon n’est pas conforme.

Plaquettes géantes

Les plaquettes géantes peuvent se situer dans la fourchette de taille des globules rouges ou dépasser la plage de détection des plaquettes utilisée par certaines méthodes de mesure. Cela peut entraîner une sous-estimation du résultat de la numération plaquettaire (PLT) ou un profil de distribution plaquettaire atypique.

Les paramètres MPV, PDW, P-LCR et l'histogramme plaquettaire peuvent fournir des informations complémentaires utiles. Toutefois, ils doivent être interprétés à la lumière des résultats du frottis sanguin plutôt que d'être utilisés comme confirmation à eux seuls de la présence de formes plaquettaires de grande taille.

3. Causes courantes de résultats de PLT faussement élevés

Un résultat de numération plaquettaire anormalement élevé peut être observé lorsque des particules non plaquettaires sont comptabilisées dans la plage de mesure des plaquettes. Cela peut se produire lorsque des fragments cellulaires, de très petits globules rouges ou d'autres particules se confondent avec des événements de la taille des plaquettes.

Fragments de globules rouges

Les schistocytes et autres fragments de globules rouges peuvent être comptabilisés comme des particules de la taille des plaquettes par certaines méthodes d'analyse. Par conséquent, le nombre de plaquettes obtenu par comptage automatisé peut être supérieur au nombre réel de plaquettes.

Ce résultat nécessite davantage qu’une simple vérification du nombre de plaquettes. En cas de fragmentation des globules rouges, le laboratoire doit également examiner les paramètres érythrocytaires, les résultats morphologiques et les procédures locales relatives aux anomalies cliniquement significatives observées au frottis.

Globules rouges extrêmement microcytaires

En cas de microcytose marquée, les petits globules rouges peuvent se confondre avec des éléments de la taille des plaquettes. Ce chevauchement peut fausser le comptage automatisé des plaquettes et entraîner un résultat PLT faussement élevé.

Les conclusions pertinentes de l'examen peuvent notamment inclure :

• Un VGM nettement bas.
• Un profil de distribution des globules rouges anormal.
• Un résultat de la PLT qui ne correspond pas au frottis sanguin.
• Séparation insuffisante entre la population de globules rouges inférieurs et les événements plaquettaires.

En cas de microcytose importante, un laboratoire peut avoir besoin d'une méthode alternative validée avant de communiquer le résultat final concernant les plaquettes.

Débris cellulaires et fragments anormaux

Les fragments de cellules leucémiques, les débris cellulaires, les résidus de globules rouges hémolysés, les micro-organismes et d’autres particules peuvent interférer avec la détection des plaquettes. Selon le principe de fonctionnement de l’analyseur, il peut être difficile de distinguer ces éléments des plaquettes sur la seule base de leur taille.

C'est pourquoi un résultat anormal de la numération plaquettaire (PLT) doit être examiné conjointement avec les indicateurs relatifs aux globules blancs (WBC), les profils des diagrammes de dispersion, les résultats concernant les globules rouges (RBC), l'aspect de l'échantillon et la morphologie du frottis périphérique. La numération plaquettaire ne doit pas être interprétée isolément lorsque plusieurs paramètres de la numération globulaire complète (CBC) ou plusieurs signaux de l'appareil sont anormaux.

Cryoprotéines et interférence particulaire

Certains échantillons peuvent contenir des protéines précipitées ou des particules susceptibles d'altérer le comptage automatisé. La précipitation des protéines due au froid, la contamination de l'échantillon ou la présence inhabituelle de particules en fond peuvent générer des tendances numériques ou graphiques inattendues.

En cas de suspicion d'interférence, les laboratoires doivent suivre leurs procédures validées pour la manipulation des échantillons et la confirmation des résultats. En fonction du processus de travail du laboratoire, cela peut impliquer de répéter l'analyse dans des conditions contrôlées, de procéder à un nouveau prélèvement, de réexaminer le frottis ou d'utiliser une autre méthode de mesure.

4. Un processus pratique de vérification PLT

Un protocole d'examen structuré permet au laboratoire d'analyser les résultats anormaux de la numération plaquettaire sans avoir recours à des répétitions inutiles des analyses.

1. Vérifiez le résultat. Évaluer le PLT en association avec le MPV, le PDW, le PCT, le P-LCR, le P-LCC, les résultats antérieurs et les paramètres correspondants de la numération globulaire complète (CBC).
2. Vérifier les signaux de l'analyseur. Vérifiez les indicateurs plaquettaires, l'histogramme des plaquettes (PLT), l'histogramme des globules rouges (RBC) et les diagrammes de dispersion des globules blancs (WBC), lorsqu'ils sont disponibles.
3. Examinez l'échantillon. Vérifiez la présence éventuelle de caillots, de fibrine, d'un sous-remplissage, d'une hémolyse, d'une lipémie ou d'une dilution éventuelle.
4. Ne répétez cela que lorsque cela est pertinent. Ne mélangez et ne refaites l'analyse de l'échantillon que s'il répond aux critères d'acceptation du laboratoire.
5. Procéder à l'examen d'un frottis lorsque cela est indiqué. Recherchez la présence d'agrégats plaquettaires, de satellitose, de plaquettes géantes, de schistocytes, de fragments ou de cellules anormales.
6. Recourez à une autre méthode de vérification si nécessaire. Suivre les procédures validées pour un anticoagulant alternatif, une méthode de mesure, un comptage manuel ou une estimation par frottis.
7. Évaluez le système lorsque cela s'avère nécessaire. En cas de suspicion de problème analytique, vérifiez le contrôle qualité, l'état des réactifs, l'étalonnage, les comptes de fond, l'historique de maintenance et les messages d'erreur.

Le processus doit permettre de distinguer les problèmes spécifiques à un échantillon des problèmes liés au système. Si un échantillon présente une anomalie alors que les résultats du contrôle qualité sont stables et que les autres échantillons du patient sont conformes, la cause est probablement liée à l'échantillon lui-même. Si plusieurs échantillons présentent un biais plaquettaire similaire, ou si les résultats du contrôle qualité se situent en dehors de la fourchette acceptable, le laboratoire doit évaluer l’analyseur, les réactifs, l’état de l’étalonnage et les registres de maintenance avant de communiquer les résultats concernés.

5. Quand un frottis sanguin périphérique est-il nécessaire ?

L'examen du frottis sanguin périphérique constitue un élément essentiel de la vérification des résultats plaquettaires lorsque le comptage automatisé est signalé comme anormal, cliniquement inattendu ou incompatible avec d'autres résultats de la numération globulaire complète. Il fournit des informations morphologiques directes qui ne peuvent pas toujours être déduites des seules données numériques.

Un examen cytologique peut permettre de détecter :

• Aglomérats de plaquettes, notamment ceux concentrés près du bord en pinceau.
• Satellitose plaquettaire autour des neutrophiles.
• Plaquettes géantes ou macroplaquettes.
• Schistocytes et autres fragments de globules rouges.
• Microcytose marquée.
• Des fragments de cellules leucémiques ou des populations de globules blancs anormales.
• Fils de fibrine et coagulation partielle.
• Autres particules susceptibles d'influencer le comptage automatisé.

Lorsque la charge de travail nécessite davantage qu’une simple analyse numérique, les flux de travail basés sur des analyseurs morphologiques peuvent apporter un élément de preuve supplémentaire. Le Analyseur hématologique automatisé O-Cyte 1 associe la numération globulaire complète (CBC) à 7 paramètres à une analyse morphologique assistée par IA au sein d'un même flux de travail. Ses résultats peuvent inclure des images cellulaires, des histogrammes, des informations morphologiques et une classification par IA étayée par des images, ce qui permet aux équipes de laboratoire d'examiner les résultats quantitatifs de la CBC en tenant compte de la morphologie cellulaire.

L'O-Cyte 1 fournit 37 paramètres, dont le PLT, le MPV, le PDW, le PCT, le PAg, le P-LCC et le P-LCR. Il prend en charge le sang total, le sang capillaire et le mode de prédilution ; le chargement par lots de 25 échantillons ; les modes STAT et de chargement automatique ; le contrôle qualité interne de la morphologie des liquides ; et un débit pouvant atteindre 60 tests par heure en fonctionnement autonome. Les configurations en cascade peuvent atteindre jusqu'à 360 tests par heure.

6. Anticoagulants alternatifs et méthodes de confirmation

En cas de suspicion d’agrégation plaquettaire liée à l’EDTA, on peut envisager de prélever un nouvel échantillon en utilisant un anticoagulant alternatif, conformément à la procédure validée par le laboratoire. Le citrate de sodium est couramment utilisé à cette fin, car il permet de réduire l’agrégation plaquettaire dépendante de l’EDTA dans certains échantillons.

Toutefois, un résultat obtenu avec du citrate ne doit pas être accepté sans examen préalable. Le citrate entraîne une dilution de l'échantillon ; tout facteur de correction, paramétrage de l'analyseur ou méthode de rapport doit donc être défini dans le cadre du protocole validé par le laboratoire lui-même. L'agrégation plaquettaire pouvant également persister dans les échantillons sans EDTA, un examen morphologique peut s'avérer nécessaire.

En fonction de l'interférence suspectée et des méthodes dont dispose le laboratoire, la confirmation peut inclure :

• Récupération dans le citrate de sodium avec une procédure de correction validée.
• Comptage optique des plaquettes.
• Comptage des plaquettes par fluorescence.
• Comptage manuel des plaquettes.
• Estimation du nombre de plaquettes par frottis sanguin périphérique.
• Répéter les analyses à l'aide d'un autre analyseur ou d'une méthode d'analyse validée.

La méthode de confirmation doit être adaptée à la cause probable de l'interférence. Un échantillon contenant des agrégats plaquettaires, par exemple, nécessite une approche différente de celle d'un échantillon contenant des schistocytes, une microcytose marquée ou des plaquettes de grande taille.

7. Contrôle qualité et dépannage des analyseurs

Les résultats anormaux de la numération plaquettaire (PLT) ne proviennent pas tous de l'échantillon. Un biais plaquettaire persistant, des alertes répétées concernant les plaquettes, une variabilité inexpliquée ou des résultats similaires sur plusieurs échantillons peuvent indiquer un problème au niveau du système d'analyse.

Lorsqu'un problème au niveau du système est suspecté, les laboratoires doivent vérifier les éléments suivants :

• Données quotidiennes sur l'état du contrôle qualité et les tendances en matière de contrôle qualité.
• Lot de réactifs, conditions de stockage, état de remplissage et dates de péremption.
• Registres d'étalonnage ou d'étalonnage-vérification.
• Résultats du comptage de fond.
• Entretien régulier et historique des interventions récentes.
• Alertes liées aux sondes, à la fluidique, aux entraînements, aux obstructions et aux bulles.
• Procédures de rinçage, de mise en service, de nettoyage et de vérification du système spécifiées par le fabricant.

L'objectif du contrôle qualité (CQ) est de vérifier que le système d'analyse fonctionne dans les limites de performance définies par le laboratoire. Si le CQ n'est pas satisfaisant, les résultats des patients concernés ne doivent pas être communiqués tant que le problème n'a pas fait l'objet d'une enquête et n'a pas été résolu conformément à la politique du laboratoire.

Cela revêt une importance particulière dans les laboratoires qui doivent associer les analyses de numération globulaire complète de routine à différentes exigences en matière de flux de travail. Analyseur hématologique Ozelle comprennent des systèmes basés sur l'IA et la technologie CBM destinés aux hôpitaux, aux laboratoires et aux environnements cliniques, avec des options de modèles couvrant les analyses compactes, les panels d'analyses multifonctionnels et les flux de travail hématologiques évolutifs.

Pour l'ensemble de la gamme de produits hématologiques, les informations publiées sur les produits portent notamment sur les configurations de numération globulaire complète (CBC) à 7 paramètres différentiels, les paramètres liés aux plaquettes (PLT), l'analyse de la morphologie cellulaire, le traitement automatisé et les différentes options de débit d'échantillons. Les spécifications de chaque modèle, les types d'échantillons pris en charge, les formats de contrôle qualité et les menus d'analyses doivent être vérifiés à l'aide de la documentation produit correspondante avant la mise en service.

8. Prévenir les erreurs évitables liées aux PLT

Un processus fiable de traitement des plaquettes commence avant même que l’échantillon n’atteigne l’analyseur. La standardisation des procédures de prélèvement, de manipulation et d’interprétation des résultats, ainsi que l’entretien régulier des instruments, permettent de réduire les répétitions inutiles des analyses et de limiter au maximum les retards dans la communication des résultats.

Les laboratoires doivent définir des procédures concernant :

• Tubes de prélèvement sanguin adaptés et volumes de prélèvement requis.
• Mélange immédiat et correct après le prélèvement.
• Contraintes liées au transport, au stockage et au délai d'analyse.
• Critères de rejet des échantillons présentant des caillots visibles ou des échantillons non conformes.
• Passez en revue les règles relatives aux alertes sur les plaquettes, aux résultats PLT inattendus, aux histogrammes anormaux et aux échecs du contrôle delta.
• Critères d'examen et de consignation des frottis sanguins périphériques.
• Autres procédures de rappel concernant les anticoagulants.
• Commentaires sur le résultat final en cas de détection d'agrégation plaquettaire ou d'autres interférences.
• Contrôle qualité, vérification de l'étalonnage et maintenance préventive.

Un résultat anormal du dosage des plaquettes (PLT) nécessite un processus d'examen qui prend en compte l'état de l'échantillon, les signaux de l'analyseur, les observations morphologiques, le statut du contrôle qualité et les méthodes de confirmation validées. Cette approche garantit la cohérence des résultats plaquettaires tout en aidant les laboratoires à déterminer si un comptage inhabituel est dû à l'échantillon du patient, à un phénomène d'interférence ou à un problème analytique.