La réalisation en interne des hémogrammes complets (CBC) peut raccourcir le délai entre le prélèvement de l'échantillon et l'analyse en laboratoire lors des consultations de routine, des visites de suivi et des cas urgents. Cependant, la mise en place d'un processus interne d'hémogramme complet en médecine vétérinaire ne se limite pas à une simple installation. Elle nécessite une couverture définie des espèces, une manipulation contrôlée des échantillons, des opérateurs formés, des contrôles qualité documentés et des règles de suivi claires en cas de résultats inattendus.

Pour les cliniques vétérinaires, la validation est particulièrement utile lorsqu’elle reflète les cas rencontrés au quotidien. Cela implique de vérifier comment l’analyseur sera utilisé pour les échantillons sanguins canins et félins, quels résultats peuvent être communiqués de manière systématique, et à quel moment le protocole doit prévoir la répétition du test, l’examen d’un frottis sanguin ou le recours à un spécialiste. Ozelle développe des analyseurs de diagnostic vétérinaire destinés à ce type de flux de travail en interne, en combinant l'hématologie avec des capacités d'analyse de l'urine, des selles et des dosages immunologiques sélectionnées au sein de la gamme EHVT.

La validation commence par l'examen des dossiers réels de la clinique

La validation de la numération globulaire complète (CBC) en médecine vétérinaire devrait commencer par une question simple mais importante : quels animaux et quels échantillons cette clinique analysera-t-elle de manière systématique ?

Pour la plupart des cabinets vétérinaires, la réponse est le sang total canin et félin anticoagulé à l’EDTA. Ce champ d’application doit être précisé dans la déclaration d’utilisation prévue de la clinique avant le début de la production systématique des rapports. Un champ d’application clairement défini permet d’éviter un problème courant dans le flux de travail : le fait de traiter tous les échantillons de sang animal comme interchangeables, alors même que les intervalles de référence spécifiques à chaque espèce, les caractéristiques cellulaires, les risques liés à la qualité des échantillons et les critères d’évaluation peuvent varier.

Il est important de tenir compte des spécificités de chaque espèce, car l'interprétation d'un résultat d'hémogramme ne se limite pas au fait qu'il se situe au-dessus ou en dessous d'une fourchette indiquée. La distribution des globules blancs, les résultats concernant les globules rouges, les résultats liés aux plaquettes et la pertinence clinique d'un résultat anormal peuvent varier entre les chiens et les chats. Une clinique doit donc vérifier séparément les protocoles de travail pour les chiens et les chats, plutôt que de supposer que les performances observées chez une espèce s’appliquent automatiquement à l’autre.

Ce qu'un processus de validation des hémogrammes vétérinaires doit permettre de vérifier

Un processus local de validation ou de vérification de la CBC n'a pas pour but de reproduire le travail de développement de produit réalisé par le fabricant. Son objectif est de confirmer que l'analyseur, les opérateurs, les procédures de manipulation des échantillons, les contrôles qualité et le processus d'examen des résultats sont adaptés à l'usage défini par le service de médecine clinique.

Ce processus doit apporter des réponses à cinq questions concrètes :

Axe de validation	Ce que la clinique doit vérifier
Utilisation prévue	Quelles espèces, quels types d'échantillons, quels opérateurs et quels paramètres de la numération globulaire sont inclus dans les rapports de routine ?
État de préparation opérationnelle	La configuration de l'analyseur, les réactifs, les matériaux de contrôle qualité, les procédures d'étalonnage, la formation du personnel et les tâches de maintenance sont-ils en place ?
Cohérence analytique	Les résultats du contrôle qualité et des nouveaux tests sont-ils conformes aux critères d'acceptation documentés par la clinique ?
Processus de comparaison	Comment la clinique évaluera-t-elle les différences significatives entre les résultats obtenus en interne et un protocole de référence ?
Examen et remontée vers les instances supérieures	Dans quels cas le personnel doit-il refaire un test, réaliser un frottis sanguin, vérifier un résultat antérieur ou envoyer un échantillon vers un laboratoire externe ?

Cette structure permet de centrer la discussion sur la véritable question qui se cache derrière le terme recherché : la validation n'est pas un simple examen de type « réussite ou échec ». Il s'agit du processus visant à mettre en place un flux de travail CBC contrôlé avant toute utilisation clinique courante.

Le flux de travail doit également établir une distinction entre les différents modules d'analyse. Un laboratoire utilisant un seul analyseur pour l'hématologie, l'analyse d'urine, de selles ou les dosages immunologiques peut tirer parti d'un flux de travail plus rationalisé, mais chaque type d'analyse présente néanmoins des exigences spécifiques en matière d'échantillons, de matériaux de contrôle qualité, de critères d'acceptation et de procédures de suivi.

Vérification spécifique à l'espèce pour les analyses hématologiques complètes chez le chien et le chat

La vérification doit commencer par la configuration de l'analyseur prévue pour les espèces cibles. Avant toute utilisation courante, la clinique doit vérifier les espèces animales prises en charge, les exigences relatives aux échantillons, les paramètres à communiquer et la méthode de calcul des intervalles de référence applicable à ses cas quotidiens.

Pour les cliniques vétérinaires canines et félines, le plan de vérification doit porter sur :

• Modes de test disponibles pour les chiens et les chats
• Procédures de prélèvement et de mélange du sang total à l'EDTA
• Règles relatives à l'étiquetage, au stockage et aux délais d'analyse des échantillons
• Hémogramme, formule leucocytaire, paramètres liés aux plaquettes et paramètres morphologiques disponibles
• Documentation relative aux intervalles de référence spécifiques à chaque espèce
• Tâches quotidiennes liées au contrôle qualité et procédures de mesures correctives
• Critères d'examen des alertes générées par l'analyseur ou des résultats inattendus
• Cas nécessitant la répétition des analyses, la relecture d'un frottis sanguin ou l'orientation vers un spécialiste pour des analyses complémentaires

C'est là que le choix des instruments et la conception du flux de travail sont étroitement liés. Une clinique qui réalise régulièrement des hémogrammes complets, des analyses d'urine et des analyses de selles doit définir non seulement la manière dont chaque examen est effectué, mais aussi la façon dont l'équipe passe d'un résultat à l'autre au cours d'une consultation.

Le Analyseur d'hématologie vétérinaire EHVT-75 est conçu pour une utilisation chez les chiens et les chats et combine une hématologie à 9 paramètres avec une analyse automatisée de l'urine et des selles. Son protocole d’hématologie utilise 100 μL d’échantillon, tandis que les analyses d’urine et de selles utilisent chacune 200 μL. L’analyseur fournit 48 paramètres de morphologie sanguine complète (CBM), notamment la numération globulaire complète (CBC), la formule leucocytaire, les paramètres relatifs aux globules rouges, aux réticulocytes, aux globules rouges nucléés et aux plaquettes. Grâce à une carte de contrôle qualité à sec, à un étalonnage automatique, à une connectivité LIS/USB/LAN et à une capacité de stockage pouvant atteindre 10 000 résultats, le système offre des fonctionnalités opérationnelles pouvant être intégrées au processus documenté de contrôle qualité et d’examen des résultats d’une clinique.

Étape 1 : Vérifier que l'analyseur est prêt à être utilisé dans le cadre d'une utilisation courante

La première étape de validation concerne l'état de préparation opérationnelle. Avant d'utiliser des échantillons de référence ou des cas cliniques dans le cadre des rapports de routine, le service clinique doit s'assurer que l'analyseur et les processus associés sont prêts.

Cela comprend :

• Modèle de l'analyseur, numéro de série, version du logiciel et configuration active
• Environnements pris en charge pour chiens et chats
• Informations sur les lots de réactifs, de diluants, de colorants, de cartouches et de consommables
• Disponibilité des matériaux de contrôle qualité, conditions de stockage et calendrier des analyses
• État de l'étalonnage et contrôles d'étalonnage requis
• Prélèvement des échantillons, étiquetage, mélange et critères de rejet
• Dossiers de formation du personnel et responsabilités opérationnelles attribuées
• Procédures d'entretien quotidien, périodique et correctif
• Exportation des données, connexion et traitements des fiches d'animaux
• Contacts pour l'assistance technique et la remontée des problèmes

Cette étape de préparation est importante car de nombreuses divergences analytiques apparentes trouvent leur origine avant même la mesure. Un mélange insuffisant de l'échantillon, un retard dans l'analyse, la formation d'un caillot partiel, un stockage inapproprié, des matériaux de contrôle qualité périmés ou un transfert de tâches peu clair entre opérateurs peuvent compromettre la fiabilité du processus, même lorsque l'analyseur fonctionne normalement.

Dans le cadre d'un établissement médical de petite taille, il est également utile de cartographier l'ensemble du parcours de l'échantillon : prélèvement, étiquetage, préparation, sélection des analyses, examen des résultats, documentation et toute action ultérieure. Cela permet d'éviter que les flux de travail relatifs à l'hématologie, à l'analyse d'urine, à l'analyse des selles et aux dosages immunologiques ne deviennent des tâches isolées, gérées selon des routines informelles différentes.

Étape 2 : Évaluer la précision et les performances du contrôle qualité de routine

L'évaluation de la précision permet de déterminer si l'analyseur produit des résultats suffisamment cohérents lorsque le même échantillon est analysé à plusieurs reprises. Dans la pratique quotidienne, cet aspect est étroitement lié au processus de contrôle qualité de la clinique.

Le centre de soins doit identifier les paramètres les plus pertinents pour son processus habituel de réalisation des hémogrammes complets. En fonction des résultats fournis par l'analyseur, cela peut inclure :

• Paramètres relatifs aux globules blancs (GB) et à la formule leucocytaire
• RBC, HGB, HCT, MCV, MCH et MCHC
• Paramètres liés aux plaquettes
• Paramètres liés aux réticulocytes ou à d'autres aspects morphologiques
• Indicateurs et résultats de l'instrument qui déclenchent une étape de révision supplémentaire

Le contrôle qualité doit être effectué conformément aux instructions de l'analyseur et au plan qualité écrit de la clinique. Ce plan doit préciser non seulement à quel moment le contrôle qualité doit être effectué, mais aussi les mesures que la clinique prendra si les résultats du contrôle qualité ne répondent pas aux critères d'acceptation prédéfinis.

Une séquence concrète de mesures correctives peut comprendre :

1. Suspendre la publication des résultats de routine pour le workflow concerné.
2. Vérifier les conditions de stockage, la date de péremption, les informations relatives au lot, la préparation et le mélange.
3. Vérifiez l'état de l'analyseur, les consommables, les registres d'entretien et les exigences en matière d'étalonnage.
4. Répétez le contrôle qualité conformément à la procédure opérationnelle standard (SOP) de la clinique.
5. Appliquez les mesures correctives requises ou contactez le support technique si le problème persiste.
6. Consigner les résultats de l'enquête, les mesures correctives, les résultats du suivi et l'autorisation de reprendre les essais.

Cette approche intègre le contrôle qualité dans le cadre du contrôle de routine du laboratoire, plutôt que de le considérer comme un élément d'une liste de vérification à cocher sans réponse définie en cas d'échec.

Étape 3 : Comparer les résultats de la numération globulaire complète (CBC) réalisés en interne avec un profil de référence

Une étude comparative permet à un cabinet vétérinaire de comprendre dans quelle mesure ses résultats de numération globulaire complète (CBC) réalisés en interne correspondent à une courbe de référence établie. En fonction des ressources dont dispose le cabinet, cela peut impliquer le recours à un laboratoire de référence, à un analyseur existant pendant une période de transition, à l'examen de frottis sanguins, à certaines méthodes manuelles ou à l'aide d'un service de pathologie clinique vétérinaire.

Les échantillons de comparaison doivent refléter la charge de travail réelle de la clinique. Dans la mesure du possible, l’étude doit inclure des échantillons couvrant des plages de résultats typiques, faibles, élevées et inattendues. Les échantillons canins et félins doivent être pris en compte séparément, car les données relatives à une espèce ne doivent pas être utilisées pour établir les performances de l’autre.

Pour chaque échantillon, la clinique doit consigner les informations suivantes :

• Espèces animales et informations pertinentes sur les cas
• Durée du prélèvement d'échantillons et durée de l'analyse
• Observations relatives aux anticoagulants et à la qualité visible des échantillons
• Résultats internes et résultats comparatifs
• Signaux pertinents ou observations liées à la morphologie
• Mesures relatives à la répétition d'un examen ou à la réexamen d'un frottis sanguin
• Une explication étayée de toute différence significative

L'objectif n'est pas d'escompter une concordance numérique parfaite entre deux méthodes analytiques. Des différences peuvent résulter du moment du prélèvement, des conditions de prélèvement, du principe de la méthode ou de la variation biologique. La question la plus pertinente est de savoir si le service clinique est en mesure de détecter, d'étudier et de prendre en charge de manière appropriée une différence susceptible d'influencer l'interprétation des résultats de laboratoire.

Si un résultat est en contradiction avec l'état clinique de l'animal, les résultats de laboratoire antérieurs ou l'aspect de l'échantillon, l'équipe doit suivre la procédure d'escalade de la clinique plutôt que de se fier uniquement au résultat automatisé.

Étape 4 : Mettre en place un processus clair de signalement et d'examen des diffamations

Les indicateurs de l'analyseur, les représentations graphiques et les résultats liés à la morphologie peuvent fournir un contexte utile pour l'examen en laboratoire. Ils doivent être interprétés comme des éléments déclencheurs d'un processus d'examen bien défini, et non comme une confirmation automatique d'une maladie spécifique ni comme un substitut à l'interprétation vétérinaire.

La clinique devrait définir par écrit les critères permettant de déterminer les résultats qui nécessitent une démarche supplémentaire. Parmi les cas les plus courants, on peut citer :

• Résultats inattendus, trop élevés ou trop bas, concernant le nombre de globules blancs (WBC), de globules rouges (RBC), le taux d'hémoglobine (HGB), l'hématocrite (HCT) ou le nombre de plaquettes
• Signaux d'alerte récurrents ou inhabituels émis par l'analyseur
• Changements notables par rapport aux données antérieures sur les animaux
• Suspicion d'agrégation plaquettaire
• Coagulation, mauvais mélange de l'échantillon, hémolyse ou autres problèmes liés à la qualité de l'échantillon
• Résultats qui ne correspondent pas au tableau clinique ou à d'autres données de laboratoire
• Échantillons provenant d'espèces ne correspondant pas à la configuration prise en charge par l'analyseur

Un parcours de révision clair peut s'écrire comme suit :

Génération des résultats de l'hémogramme → vérification de la qualité de l'échantillon et du statut du contrôle qualité → répétition de l'analyse si nécessaire → examen des mentions d'alerte et des observations morphologiques disponibles → réalisation d'un frottis sanguin si indiqué → examen des résultats en tenant compte des informations cliniques → organisation d'analyses complémentaires ou d'une consultation chez un spécialiste si nécessaire.

Cette séquence permet à l'analyseur de remplir correctement son rôle : fournir des informations hématologiques utiles à l'examen en laboratoire et à l'évaluation des cas vétérinaires.

Pour les cliniques qui ont besoin de disposer en interne d'un éventail plus large de tests en complément de la numération globulaire complète (CBC), le Analyseur vétérinaire multifonction EHVT-50 Il combine l'hématologie canine et féline à 9 paramètres avec des tests immunologiques, des analyses d'urine et des analyses de selles. Le module d'hématologie fournit 48 paramètres CBM, notamment le nombre de globules blancs (GB) et la formule leucocytaire, les indices érythrocytaires, les valeurs réticulocytaires, le SPH, l'ETG, les résultats liés aux hématomes réticulo-cytariques (NRBC) et les paramètres plaquettaires. Le volume d’échantillon indiqué pour l’analyseur est compris entre 100 et 200 μL, et son débit est de 5 à 7 échantillons par heure. Il offre également un contrôle qualité par carte sèche, un étalonnage automatique, une connectivité LIS/USB/LAN, un écran tactile couleur de 10,1 pouces et une capacité de stockage pouvant atteindre 10 000 résultats. Ces fonctionnalités permettent d’optimiser l’organisation du flux de travail diagnostique, tandis que chaque module doit rester soumis à ses propres procédures opérationnelles standard (SOP) en matière de manipulation des échantillons, de contrôle qualité et d’examen des résultats.

Étape 5 : Consigner les intervalles de référence spécifiques à chaque espèce

Les intervalles de référence constituent un élément essentiel de l'interprétation de la numération globulaire complète (CBC) en médecine vétérinaire. Ils permettent de déterminer si un résultat est conforme aux attentes, s'il nécessite un examen plus approfondi ou s'il doit être pris en compte en tenant compte des caractéristiques individuelles de l'animal et des observations cliniques.

La clinique doit consigner les éléments suivants :

• Intervalles de référence canins et félins utilisés pour chaque paramètre rapporté
• La source de l'intervalle, la version et la configuration prévue de l'analyseur
• Qui est chargé d'approuver et de mettre à jour le registre des intervalles ?
• Comment la clinique prend en compte l'âge, la race, l'état physiologique et d'autres facteurs d'interprétation
• Procédure applicable aux échantillons ne relevant pas du champ d'application habituel des espèces

Un intervalle de référence affiché ne doit pas être considéré comme une fourchette universelle applicable à tous les animaux. Il convient de le réévaluer en fonction de la configuration de l’analyseur prévue pour l’espèce concernée et du protocole de travail défini par la clinique. Cela revêt une importance particulière lorsque les cliniques reçoivent des échantillons provenant d’espèces non courantes, pour lesquelles un examen manuel, des analyses en laboratoire de référence ou une consultation en pathologie clinique vétérinaire peuvent s’avérer plus appropriés.

Étape 6 : Assurer la validation grâce à une gestion continue de la qualité

La vérification initiale permet de définir le processus ; la gestion continue de la qualité assure son maintien. Une clinique doit réévaluer le processus dès lors qu'un changement est susceptible d'affecter ses performances, la cohérence des résultats ou son fonctionnement courant.

En voici quelques exemples :

• Un nouveau lot de réactif, de matériau de contrôle qualité ou de consommable essentiel
• Travaux d'entretien majeurs, de réparation ou de déménagement
• Opérations d'étalonnage ou mises à jour logicielles
• Indisponibilité prolongée de l'analyseur
• Changements persistants dans le contrôle qualité ou divergences répétées dans les résultats
• Une modification de la composition des espèces prises en charge par la clinique, du volume d'échantillons ou de la gamme d'analyses proposées
• Utilisation élargie des modules d'analyse d'urine, de selles ou d'immunoanalyse

Pour les cliniques qui se demandent si un analyseur spécialisé en hématologie ou un flux de travail multifonctionnel plus général correspond mieux à leur charge de travail, Analyseur sanguin vétérinaire ou analyseur multifonction ? explique comment les types d'échantillons, les effectifs, le volume d'analyses, les capacités en matière de gestion de la qualité et les besoins en laboratoires de référence peuvent influencer cette décision. Ces mêmes facteurs doivent être pris en compte lors de la planification de la validation : plus une clinique met en place de modules d'analyse, plus il devient important de maintenir des procédures de qualité distinctes et clairement documentées pour chaque module.

Conclusion

La validation d’un analyseur de numération globulaire complète (CBC) vétérinaire doit s’articuler autour du champ d’application réel des analyses effectuées par la clinique, et non autour d’une définition générique de l’usage vétérinaire. Pour les analyses internes chez le chien et le chat, cela implique de définir les exigences relatives aux échantillons, les responsabilités des opérateurs, les procédures de contrôle qualité, les intervalles de référence, les critères d’évaluation des résultats et les procédures d’escalade avant de commencer à établir les rapports de routine.

Un analyseur compact permet d'intégrer davantage les analyses hématologiques et certains examens complémentaires au déroulement des consultations. Son intérêt dépend de la capacité de la clinique à associer cet équipement à une gestion rigoureuse des échantillons, à un contrôle qualité, à des critères d'évaluation documentés et à une interprétation vétérinaire.

Lorsque la validation est envisagée comme un processus continu plutôt que comme une tâche ponctuelle liée à la mise en place du système, les cliniques peuvent organiser la réalisation en interne des hémogrammes complets en définissant des limites opérationnelles plus claires pour les résultats de routine, l'examen des frottis sanguins, les analyses en sous-traitance et la gestion continue de la qualité.